一、原位雜交儀應用 ①細胞特異性mRNA轉錄的定位,可用于基因圖譜,基因表達和基因組進(jìn)化的研究;②感染組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位,如EB病毒mRNA、人類(lèi)乳頭狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA的檢測;
③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉錄水平的表達及其變化的檢測;
④基因在染色體上的定位;
⑤檢測染色體的變化,如染色體數量異常和染色體易位等;
⑥分裂間期細胞遺傳學(xué)的研究,如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定,某些腫瘤的診斷和生物學(xué)劑量測定等。
二、注意事項
1、固定液的選擇及固定時(shí)間 石蠟組織建議用10%中性緩沖福爾馬林固定6~48h,其它固定液對實(shí)驗結果可能產(chǎn)生一定的影響。 組織離體后應盡快固定,建議在標本離體后30min內固定。如樣本固定不及時(shí),熒光信號會(huì )減弱。 固定液的體積是組織體積的4~20倍,否則固定不充分,容易出現無(wú)信號或者信號很弱的現象。 而且,為了保證信號的準確性,蠟塊最好在2年內進(jìn)行檢測,已經(jīng)切好的切片在6周內檢測最佳。
2、組織切片和載玻片的選擇 組織切片4~5μm 厚,過(guò)厚或過(guò)薄的切片均會(huì )對信號的強弱產(chǎn)生影響,而且切片應完整,質(zhì)量良好,否則會(huì )在預處理時(shí)掉片。 載玻片的選擇建議使用防脫載玻片,有條件的實(shí)驗室可使用更好的陽(yáng)離子或者陰離子專(zhuān)用載玻片,可有效防止脫片現象的發(fā)生。